霍乱弧菌检测的检查过程.docx

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霍乱弧菌检测的检查过程(1)、增菌称取检样25g,加入装有225mL碱性蛋白陈水(APW)的广口瓶内。固体样品应以均质器9000rmi11-10000rmin打碎，或以剪刀充分剪碎。(36+1)OC培养6h8h和16h-24ho如为牡蛎样品，应同样制备另一份检样，置于APW中，42C培养6h-8h和16h-24ho(2)、分离以3m11-5m11接种环取6h8h和16h24h增菌培养液的表面生长物一环分别划线家终于TCBS琼脂平板至少各一个，于(361)培养18-24h。在TCBS琼脂上，典型的霍乱弧菌菌落为大的，光滑，黄色，稍平，具有不透明中心和半透明的边缘。(3)、初步鉴定用接种环挑取TCBS琼脂平板上2-5个可疑菌落，划线于TlNl琼脂平板上，(361)C培养12h-18ho以无菌白色滤纸沾取TINI琼脂表面培养物，滴加氧化酶试剂进行氧化酶试验。以无菌环取氧化酶阳性的培养物于0.5%去氧胆酸钠液试剂滴中，进行粘丝试验。以接种针取氧化酶和粘丝试验阳性的培养物，接种TSI.KIA和AGS,穿刺底层并划线斜面。以接种针取上项相同培养物接种TlNO和T1N3肉汤。将TSI、KIA.AGS.TINo和T1N3肉汤于（361）培养18h-24ho