猪肉品质遗传改良.ppt
猪肉品质遗传改良猪肉品质遗传改良针对的产业问题针对的产业问题n长期对生长和产肉量的高强度选育加速了猪生产长期对生长和产肉量的高强度选育加速了猪生产性能的改良，集约化饲养的强应激更使得猪肉品性能的改良，集约化饲养的强应激更使得猪肉品质下降成为普遍趋势。质下降成为普遍趋势。n国内外消费市场对优质猪肉的需求日益增大，在国内外消费市场对优质猪肉的需求日益增大，在提高产肉性能的同时确保肉质性状优良是当前全提高产肉性能的同时确保肉质性状优良是当前全世界的一个研究热点和难点。世界的一个研究热点和难点。n围绕肉色、围绕肉色、pHpH值、嫩度、滴水损失、肌内脂肪含值、嫩度、滴水损失、肌内脂肪含量等对经济价值影响巨大的肉质性状进行了大量量等对经济价值影响巨大的肉质性状进行了大量研究，但长期缺乏统一的标准化评估技术、缺乏研究，但长期缺乏统一的标准化评估技术、缺乏从基因网络的角度来解释肉质性状的遗传机制，从基因网络的角度来解释肉质性状的遗传机制，难以实现对肉质性状的选育和提高。难以实现对肉质性状的选育和提高。核心技术与实施内容核心技术与实施内容 n1 1、重要肉质性状（肉色、重要肉质性状（肉色、pHpH值、嫩度、值、嫩度、滴水损失、肌内脂肪含量）的标准化评滴水损失、肌内脂肪含量）的标准化评估技术估技术 n2 2、猪几个主要肉质特性遗传机制的遗传猪几个主要肉质特性遗传机制的遗传基础研究基础研究n3 3、优良肉猪的选育与产业化示范技术优良肉猪的选育与产业化示范技术 1 1、重要肉质性状的标准化评估技术重要肉质性状的标准化评估技术n在大规模测定基础上对国内现有的各在大规模测定基础上对国内现有的各种肉质性状采样标准和测定方法加以种肉质性状采样标准和测定方法加以统一，结合后备种猪性能测定和遗传统一，结合后备种猪性能测定和遗传评估的需要，建立全国统一的猪重要评估的需要，建立全国统一的猪重要肉质性状肉质性状标准化评估技术体系标准化评估技术体系。n几个重要肉质性状：肉色、几个重要肉质性状：肉色、pHpH值、嫩值、嫩度、滴水损失、肌内脂肪含量度、滴水损失、肌内脂肪含量猪肉嫩度性状评判体系的建立猪肉嫩度性状评判体系的建立 n利用高精度物性测试仪（利用高精度物性测试仪（SMS），模拟人口腔对肉制品的咀嚼动作，实时收集模拟人口腔对肉制品的咀嚼动作，实时收集力量变化。力量变化。TAXT2i Texture AnalyserStable Micro System Ltd,UK 沃布氏沃布氏刀具刀具剪切剪切实验实验最大剪切力最大剪切力平均剪切力平均剪切力硬度值硬度值取样器取样器=12.7mm肌纤维方向肌纤维方向沿肌纤维方向钻取肉样沿肌纤维方向钻取肉样嫩度分析嫩度分析Texture Profile Analysisn收集弹性，韧性，收集弹性，韧性，脆性、硬度等多项脆性、硬度等多项数据数据n补充剪切实验所不补充剪切实验所不能收集到的数据能收集到的数据柱状探头或星形探头柱状探头或星形探头往复两次压缩样品往复两次压缩样品压缩压缩n硬度硬度n粘性粘性n弹性弹性2 2、猪几个主要肉质特性遗传机制的遗传基础研究猪几个主要肉质特性遗传机制的遗传基础研究n 猪几个重要肉质性状（肉色、猪几个重要肉质性状（肉色、pHpH值、嫩度、值、嫩度、滴水损失、肌内脂肪含量）的遗传机制研究：滴水损失、肌内脂肪含量）的遗传机制研究：n运用高通量测序技术和全基因组表达谱芯片技运用高通量测序技术和全基因组表达谱芯片技术，结合甲基化分析技术筛选与几个主要肉质术，结合甲基化分析技术筛选与几个主要肉质性状相关的重要调控基因及其基因调控网络。性状相关的重要调控基因及其基因调控网络。n在研究功能基因的同时，研究相关的非编码在研究功能基因的同时，研究相关的非编码RNARNA（主要是（主要是miRNAmiRNA），进一步阐明重要肉质性状的），进一步阐明重要肉质性状的遗传调控机制。遗传调控机制。RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit（Qiagen,Germany）RNeasy Lipid Tissue Mini Kit（Qiagen,Germany）RNA提取提取 cRNA标记标记 1%琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳(初步质检初步质检)定量检测定量检测(Agilent2100 Bioanalyzer)Pronto Universal Hybridization Kit(Corning,USA)杂交杂交 TaKaRa Spaced Cover Glass（Takara,Japan）42,12-14 hScanArray4000(PE,USA)532 nm(Cy3)635 nm(Cy5)扫描扫描 引引自：自：Butte A.The use and analysis of microarray data.Nat Rev Drug Discov.2002,1(12):951-60.基因芯片基因芯片试验流程试验流程n 决定主要肉质性状重要功能基因的验证及决定主要肉质性状重要功能基因的验证及其基因调控网络分析其基因调控网络分析:n运用多种技术（运用多种技术（Real Time-PCRReal Time-PCR技术、技术、Western-blotWestern-blot技术）对测序和基因芯片试验技术）对测序和基因芯片试验结果进行验证。结果进行验证。l根据调控网络，筛选出一些根据调控网络，筛选出一些重要节点上的基因。重要节点上的基因。l进一步根据其已知的生理功进一步根据其已知的生理功能和现有文献确定候选基因能和现有文献确定候选基因进行单独分析。进行单独分析。动态贝叶斯网络模型动态贝叶斯网络模型DBN model基因芯片基因调控网络荧光定量PCR与基因芯片和结果的相关分析 n 猪肉肌纤维构成与猪肉品质关联性研究：猪肉肌纤维构成与猪肉品质关联性研究：n运用多种肌纤维分型技术（组织酶学染色法；针运用多种肌纤维分型技术（组织酶学染色法；针对肌球蛋白重链对肌球蛋白重链（Myosin heavy chain isoforms,MyHC）的免疫组化法的免疫组化法、ATP激酶激酶（ATPase）染色法和实时）染色法和实时RT-PCR法等法等）实现准）实现准确的肌纤维分型。确的肌纤维分型。n在实现准确地肌纤维分型的基础上，研究肌纤维在实现准确地肌纤维分型的基础上，研究肌纤维构成对猪肉品质的影响作用。构成对猪肉品质的影响作用。采用免疫组化法对猪眼肌和腰肌中的肌纤维进行分析，获采用免疫组化法对猪眼肌和腰肌中的肌纤维进行分析，获得高质量免疫荧光组化图片。得高质量免疫荧光组化图片。a、FITC荧光染色，b、油红O染色，c、DAPI染色，d、3种染色叠加效果图 快肌免疫荧光组化结果快肌免疫荧光组化结果慢肌免疫荧光组化结果慢肌免疫荧光组化结果n 糖原酵解过程的遗传机制及其对猪肉品质的糖原酵解过程的遗传机制及其对猪肉品质的影响研究：影响研究：n以糖酵解过程为重点，研究屠宰后和应激条件下以糖酵解过程为重点，研究屠宰后和应激条件下影响猪肉品质的遗传和生理生化机制。影响猪肉品质的遗传和生理生化机制。3 3、优良肉猪的选育与产业化示范技术优良肉猪的选育与产业化示范技术n 猪肉质性状指数的构建及其运用于综合选猪肉质性状指数的构建及其运用于综合选择指数的研究：择指数的研究：n研究将肉质性状纳入综合选择指数，并运用研究将肉质性状纳入综合选择指数，并运用于性能测定和配套系选育。于性能测定和配套系选育。n 高肌内脂肪含量优质商品肉猪的杂交选育高肌内脂肪含量优质商品肉猪的杂交选育和配套系生产技术研究和示范：和配套系生产技术研究和示范：n通过杂交选育和配套系生产等实用技术培育通过杂交选育和配套系生产等实用技术培育高肌内脂肪含量优质配套系商品猪，实现猪高肌内脂肪含量优质配套系商品猪，实现猪肉品质遗传改良关键技术的示范。肉品质遗传改良关键技术的示范。主要考核主要考核指标指标n（1 1）建立一套全国统一的猪肉质性状标准化建立一套全国统一的猪肉质性状标准化评估技术体系；评估技术体系；n（2 2）明确几个主要肉质性状（肌内脂肪含量、明确几个主要肉质性状（肌内脂肪含量、pHpH值、嫩度等）相关的调控基因及其基因调控值、嫩度等）相关的调控基因及其基因调控网络；网络；n（3 3）形成一套以分子育种、杂交选育和配套形成一套以分子育种、杂交选育和配套系生产为基础的综合技术体系，并运用于进行系生产为基础的综合技术体系，并运用于进行选育高肌内脂肪含量优质肉猪配套系，使优质选育高肌内脂肪含量优质肉猪配套系，使优质肉猪配套系的肌内脂肪含量达到肉猪配套系的肌内脂肪含量达到2.5%2.5%左右；左右；n（4 4）发表相关学术研究论文。）发表相关学术研究论文。
