大肠菌群检验.ppt.ppt

1、作为粪便污染食品的指标菌 有来源特异性，即仅来自肠道。在肠道中的数量较多，易于检出。在外环境中有足够的抵抗力，能生存一定期间。食品细菌学检验方法敏感、特异。2、作为肠道致病菌污染食品的指标菌。0.1g3 0.01g 3 0.001g 3 乳糖胆盐发酵管 37 24hr 产酸产气管 伊红美蓝平板（分离）37 24hr可疑菌落 乳糖发酵管（证实）37 24hr 根据经证实的乳糖胆盐发酵管 阳性管数，查MPN表。样品 0.1g2 0.01g 2 0.001g 2 结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）37 24hr 计数紫红色菌落，乘以稀释倍数报告1、检测步骤、检测步骤 样品 0.1g3 0.01g 3 0.001g 3 MUGal肉汤 37 24hr 在紫外光下观察产荧光管数，查MPN表得MPN值 大肠菌群大肠菌群-D-半乳糖苷酶半乳糖苷酶 4-甲基伞形酮甲基伞形酮-D-半乳糖苷半乳糖苷 4-甲基伞形酮（兰色荧光）甲基伞形酮（兰色荧光）当在当在MUGal肉汤中生长的大肠菌群数量较少时肉汤中生长的大肠菌群数量较少时也可在紫外灯下呈现明显的蓝色荧光，反应较也可在紫外灯下呈现明显的蓝色荧光，反应较乳糖产酸显色快速灵敏，结果易读。乳糖产酸显色快速灵敏，结果易读。以以13株与肠杆菌科相关的标准菌株验证株与肠杆菌科相关的标准菌株验证MUGal肉汤，其结果与在肉汤，其结果与在LST和乳糖胆盐肉汤中的乳和乳糖胆盐肉汤中的乳糖发酵结果完全一致，符合相关菌株的特性。糖发酵结果完全一致，符合相关菌株的特性。将自制将自制MUGal与与SIGMA产产MUGal比较测试比较测试26份样品，两者阳性符合率为份样品，两者阳性符合率为94.6%。以自制以自制MUGal肉汤与肉汤与LST肉汤比较检测肉汤比较检测66份样份样品中大肠菌群，其品中大肠菌群，其24h阳性检出率是阳性检出率是LST肉汤肉汤48h的的1.5倍，但延长倍，但延长LST肉汤培养时间至肉汤培养时间至96小小时后，两者结果逐步接近。表明时后，两者结果逐步接近。表明MUGal多检出多检出的阳性部分多为受伤生长缓慢或迟缓发酵乳糖的阳性部分多为受伤生长缓慢或迟缓发酵乳糖的大肠菌群类菌株所致。的大肠菌群类菌株所致。将将MUGal肉汤阳性管中的可疑菌株进行触酶、肉汤阳性管中的可疑菌株进行触酶、氧化酶和硝酸盐还原试验，并任选其中氧化酶和硝酸盐还原试验，并任选其中18株用株用API 20E鉴定。证明鉴定。证明95.1%的的MUGal肉汤阳性肉汤阳性管中含有大肠菌群。管中含有大肠菌群。综上所述，自制综上所述，自制MUGal肉汤检测大肠菌群灵肉汤检测大肠菌群灵敏、快速、准确，无需验证，可一次完成。自敏、快速、准确，无需验证，可一次完成。自制制MUGal性质稳定，无游离荧光，可替代昂贵性质稳定，无游离荧光，可替代昂贵的进口产品使用。鉴于以的进口产品使用。鉴于以MUGal检测大肠菌群检测大肠菌群的方法早在的方法早在1995年即为美国国家环境保护署采年即为美国国家环境保护署采纳纳，有关大肠菌群具有，有关大肠菌群具有-半乳糖苷酶的特性，半乳糖苷酶的特性，也在也在ISO 9308-1:2000给予了明确的定义。因此，给予了明确的定义。因此，经过本次试验我们认为，以经过本次试验我们认为，以MUGal肉汤快速检肉汤快速检测食品中大肠菌群作为一种推荐的标准方法加测食品中大肠菌群作为一种推荐的标准方法加以应用是可行的。以应用是可行的。样品 0.1g2 0.01g 2 0.001g 2 Aliz-gal琼脂37 24hr 计数紫色和红色菌落，乘以稀释倍数报告 大肠菌群大肠菌群-D-半乳糖苷酶半乳糖苷酶-D-半乳糖苷半乳糖苷 （紫色和红色）