2024聚凝胺法交叉配血试验操作规程.docx

2024聚凝胺法交叉配血试验操作规程1 .原理聚凝胺试验(POlybrene)使用低离子介质(IoWionicmedium,LIM)加速IgG型抗体与红细胞之间的反应速度。聚凝胺作为一种碱性分子可以和红细胞表面的酸性糖分子结合，在离心力的作用下聚凝胺使红细胞相互靠近,使得已经结合在红细胞表面的IgG抗体分子可以在不同的红细胞之间搭桥。然后加入重悬液，使得聚凝胺的作用被消除。被聚凝胺凝集起来的红细胞，此时会渐渐散开，但已经被IgG抗体分子搭桥连接起来的红细胞不会散开，以此检测血清或血浆中存在的血型抗体。本试验具有敏感性高及快速等优点，已应用于血型检查、抗体筛选和鉴定交叉配血试验。聚凝胺试剂目前国内市场有售。2 .试剂与器材2.1 低离子介质(LIM)。2.2 Polybrene试剂。2.3 2%5%已知抗原的红细胞生理盐水悬液2.4 重悬液。3操作1.1 主侧配血向试管中加入患者血清2滴和献血者2%5%红细胞悬液1滴。次侧配血：向试管中加入献血者血清2滴和患者2%5%红细胞悬液1滴。1.2 立即以1000Xg离心，观察结果。如果阴性则继续试验；如果阳性，需分析原因排除干扰后继续后续试验。1.3 加0.6mlLIM试齐I，室温放置1分钟。1.4 加入2滴polybrene试剂,立即以IOoOxg离心1分钟，弃去试管中液体，轻摇试管，肉眼判断红细胞凝集情况。如果有凝集出现则继续操作。如果没有凝集出现则该试验无效。1.5 加人1滴重悬液，轻摇试管，肉眼观察结果。4 .结果判定1分钟内凝集消失为聚凝胺试验阴性，1分钟内凝集不消失为聚凝胺试验阳性。5 .注意事项5.1 通常情况下,使用LISS和LIM试剂作为缩短抗原-抗体的反应时间是同时有效的。5.2 加人重悬液后，应尽快观察结果，以免弱反应消失。5.3 肝素会中和聚凝胺的作用，应避免用肝素抗凝的血样。5.4 聚凝胺方法不适合Kell系统抗体的检测，所以对阴性结果需进行抗球蛋白试验，以免漏检。黄种人中Kell系统抗体极罕见。参考文献川尚红，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程（第4版）M.北京：人民卫生出版社，2019.