第07章巴比妥类药物的分析.ppt
一、结构分析(Analysis of structure)5,55,5取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物1,5,51,5,5取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物5,55,5取代的硫代巴比妥类药物取代的硫代巴比妥类药物巴比妥类药物基本结构通式巴比妥类药物基本结构通式 CCCONONC OR1R2R3543216HH区别各种巴比妥类药物 环状丙二酰脲、1,3-二酰亚胺基团 决定巴比妥类药物的特性 1.环状母核部分2.取代基部分二、理化性质(Physical and chemical properties)（一）物理性质（一）物理性质 1.1.白色结晶或结晶性粉末，具有固定的熔点。白色结晶或结晶性粉末，具有固定的熔点。2.2.游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶游离巴比妥类药物微溶或极微溶于水，易溶于乙醇及有机溶剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。剂；其钠盐则易溶于水，而不溶于有机溶剂。（二）（二）化学性质化学性质 巴比妥类药物分子结构中都有巴比妥类药物分子结构中都有1,3-1,3-二酰亚胺基团，能发生二酰亚胺基团，能发生酮式和烯醇式的互变异构，在水溶液中可以发生二级电离。因酮式和烯醇式的互变异构，在水溶液中可以发生二级电离。因此，本类药物的水溶液显弱酸性（此，本类药物的水溶液显弱酸性（pKapKa为为7.3-8.47.3-8.4），可与强碱），可与强碱形成水溶性的盐类。形成水溶性的盐类。1.弱酸性CCCONONC OHR1R2HCCCONONC OR1R2HHCCCONONC OR1R2HCCCONONC OR1R2+H+H+pK1=8+H+H+pK2=12与强碱的成盐反应：与强碱的成盐反应：CO NHCNCOOHR1R2+NaOHCO NHCNCOONaR1R2+H2O2.与重金属离子反应233Na CO3AgNO5 5AgNO ，取代的巴比妥类药物可溶性一银盐二银盐白色（1）与银盐的反应 CONCNCOCR1R2ONaAg+NaHCO3NaNO3+CONHCNCOCR1R2ONa+AgNO3+Na2CO3NaNO3+CONCNCOCR1R2OAgAgAgNO3+CONCNCOCR1R2ONaAg可溶性一银盐取代的巴比妥类药物，323CONa AgNO551（2）与铜盐的反应 巴比妥类药物+紫色或紫色 铜吡啶试液吡啶硫喷妥钠+绿色铜吡啶试液吡啶CR1R2COCONHNHCO水吡啶CR1R2COCONNHC OHCR1R2COCONNHCO-+H+部分离子化N+CuSO42NNCu2+SO42-CR1R2COCONNHC O-2+NNCu2+CR1R2COCONNHCOCR1R2COCONNHCOCuNN有色配位化合物有色配位化合物（3）与钴盐的反应紫堇色钴盐巴比妥类药物碱性 反应条件：无水反应条件：无水;所用试剂均应不含水分。碱性：异丙胺所用试剂均应不含水分。碱性：异丙胺CO NHCONHCOR1R22+Co2+4(CH3)2CHNH2+CoR2R1CONHCONCOR2R1NCONHCOCONHCH(CH3)2NHCH(CH3)2(CH3)2CHN+H32（4）与汞盐的反应巴比妥类药物巴比妥类药物+汞盐汞盐白色白色（可溶于氨试液）（可溶于氨试液）3.水解反应 巴比妥类药物+NaOHNH3+2Na2CO3COONaR1R2+2NH3 CONHCNCOOHR1R2+5NaOH5.紫外吸收光谱特征A.H2SO4溶液溶液(0.05mol/L)B.pH9.9缓冲溶液缓冲溶液C.NaOH溶液溶液(0.1mol/L)(pH 13)巴比妥类药物的紫外吸收光谱巴比妥类药物的紫外吸收光谱Anm4.与香草醛（vanillin）的反应 浓硫酸巴比妥类药物香草醛棕红色 5,5-5,5-取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物 在在pH=2pH=2的酸性溶液中，因不电离，几乎无明显的紫外吸收。的酸性溶液中，因不电离，几乎无明显的紫外吸收。在在pH=10pH=10的碱性溶液中，发生一级电离，于的碱性溶液中，发生一级电离，于240 nm240 nm处有最大处有最大吸收。吸收。在在pH=13pH=13的强碱性溶液中，发生二级电离，最大吸收红移至的强碱性溶液中，发生二级电离，最大吸收红移至255 nm255 nm处。处。巴比妥类药物的紫外吸收光谱特征和其电离程度有关。硫代巴比妥类药物在酸性或碱性溶液中，均有较硫代巴比妥类药物在酸性或碱性溶液中，均有较明显的紫外吸收。明显的紫外吸收。6.特殊元素及取代基的反应 司可巴比妥可使溴试液或碘试液褪色（1）不饱和烃取代基的反应 与溴试液或碘试液的反应 与KMnO4的反应可还原紫色的KMnO4为棕色的MnO2（2）芳环取代基的反应 黄色苯巴比妥423SOHKNO 硝化反应 与NaNO2H2SO4反应 苯巴比妥与之反应生成玫瑰红色环 苯巴比妥与之反应生成橙黄色橙红色 与甲醛H2SO4反应（3）硫元素的反应（黑色）白色硫喷妥钠 PbS PbNaOH2一、丙二酰脲类反应 取供试品约取供试品约0.1g0.1g，加碳酸钠试液，加碳酸钠试液1ml1ml与水与水10m110m1，振摇，振摇2min2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即白色沉淀，振摇，沉淀滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。即溶解；继续滴加过量的硝酸银试液，沉淀不再溶解。1.与银盐的反应 取供试品约取供试品约50mg50mg，加吡啶溶液（，加吡啶溶液（110110）5m15m1，溶解后，加，溶解后，加铜吡啶试液（硫酸铜铜吡啶试液（硫酸铜4g4g，水，水90ml90ml溶解后，加吡啶溶解后，加吡啶30m130m1，即得），即得）1m11m1，即显紫色或生成紫色沉淀。，即显紫色或生成紫色沉淀。2.与铜盐的反应 巴比妥类的钠盐酸 游离巴比妥类药物 过滤 洗涤 干燥 测熔点 二、熔点测定及衍生物熔点测定 1.熔点测定 取本品约取本品约0.5 g0.5 g，加水，加水5 ml5 ml溶解后，加稍过量稀盐酸，溶解后，加稍过量稀盐酸，即析出白色结晶性沉淀，滤过；沉淀用水洗净，在即析出白色结晶性沉淀，滤过；沉淀用水洗净，在105105干干燥后，依法测定，熔点为燥后，依法测定，熔点为174-178174-178。苯巴比妥钠的鉴别苯巴比妥钠的鉴别 ChPChP（20002000）取丁巴比妥取丁巴比妥0.5g0.5g，加，加1mol/L1mol/L碳酸钠溶液碳酸钠溶液5ml5ml使溶解，使溶解，加加4.54.5（W/VW/V）对硝基氯苄的乙醇溶液）对硝基氯苄的乙醇溶液10m110m1，在水浴上加，在水浴上加热回流热回流30min30min，放置，放置1h1h后，滤过，所得沉淀用后，滤过，所得沉淀用9696的乙醇的乙醇进行重结晶后，在进行重结晶后，在100100105105干燥，测定衍生物的熔点，干燥，测定衍生物的熔点，应为应为150150左右。左右。2.衍生物熔点测定鉴别丁巴比妥丁巴比妥 BP（1988）三、钠盐的鉴别反应 1.焰色反应 取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色 2.与醋酸氧铀锌反应 取供试品的中性溶液，加醋酸氧铀锌试液，即生成黄色四、特殊取代基或元素的反应 司可巴比妥钠司可巴比妥钠 ChPChP（20002000）【鉴别】（3 3）取本品）取本品0.1 g0.1 g，加水，加水10 ml10 ml溶解后，加碘试液溶解后，加碘试液2m12m1，所显棕黄色在所显棕黄色在5 min5 min内消失。内消失。1.不饱和烃取代基的反应 苯巴比妥苯巴比妥 ChPChP（20002000）【鉴别鉴别】（2 2）取本品约）取本品约10 mg10 mg，加硫酸，加硫酸2 2滴与亚硝酸钠约滴与亚硝酸钠约5 mg5 mg，混合，即显橙黄色，随即转橙红色混合，即显橙黄色，随即转橙红色与亚硝酸钠与亚硝酸钠硫酸的反硫酸的反应应2.芳环取代基的反应（3 3）取本品约）取本品约50 mg50 mg，置试管中，加甲醛试液，置试管中，加甲醛试液1 ml1 ml，加热煮，加热煮沸，冷却，沿管壁缓缓加硫酸沸，冷却，沿管壁缓缓加硫酸0.5 ml0.5 ml，使成两液层，置水浴，使成两液层，置水浴中加热。中加热。界面显玫瑰红色界面显玫瑰红色与甲醛与甲醛硫酸的反应硫酸的反应 注射用硫喷妥钠注射用硫喷妥钠 ChPChP（20002000）【鉴别鉴别】（3 3）取本品约）取本品约0.2 g0.2 g，加氢氧化钠试液，加氢氧化钠试液5 ml5 ml与醋酸与醋酸铅试液铅试液2 ml2 ml，生成白色沉淀；加热后，沉淀变为黑色。，生成白色沉淀；加热后，沉淀变为黑色。3.硫元素的反应JPJP（1414）异戊巴比妥、巴比妥）异戊巴比妥、巴比妥 取异戊巴比妥或巴比妥取异戊巴比妥或巴比妥0.2 g0.2 g，加氢氧化钠试液，加氢氧化钠试液10 m110 m1，加，加热煮沸，则产生具氨臭的气体。热煮沸，则产生具氨臭的气体。五、水解反应BPBP（19981998）戊巴比妥）戊巴比妥 于瓷盘中放入戊巴比妥于瓷盘中放入戊巴比妥10 mg10 mg和香草醛和香草醛10 mg10 mg，加浓硫酸，加浓硫酸0.15 0.15 m1m1，混合后，放在水浴上加热，混合后，放在水浴上加热30 s30 s，即产生棕红色。放冷，加，即产生棕红色。放冷，加9696的乙醇的乙醇0.5 m10.5 m1，颜色则转变为暗蓝色。，颜色则转变为暗蓝色。六、与香草醛的反应七、紫外吸收光谱特征5,5-取代的巴比妥类药物取代的巴比妥类药物 pH=2pH=2的酸性溶液中，因不电离，几乎无明显的紫外吸收。的酸性溶液中，因不电离，几乎无明显的紫外吸收。pH=10pH=10的碱性溶液中，发生一级电离，的碱性溶液中，发生一级电离，240 nm240 nm处有最大吸收。处有最大吸收。pH=13pH=13的强碱性溶液中，发生二级电离，最大吸收红移至的强碱性溶液中，发生二级电离，最大吸收红移至255 nm255 nm。硫代巴比妥类药物硫代巴比妥类药物在酸性或碱性溶液中，均有较明显的紫外吸收。在酸性或碱性溶液中，均有较明显的紫外吸收。司可巴比妥钠 ChP（2000）【鉴别】（4）本品的红外光吸收图谱与对照的图谱本品的红外光吸收图谱与对照的图谱（光谱集（光谱集137图）一致。图）一致。八、红外光谱法TLC：生物样品分析生物样品分析一般采用对照品（或标准品）比较法，要求供试品斑点的一般采用对照品（或标准品）比较法，要求供试品斑点的Rf值值应与对照品斑点一致。应与对照品斑点一致。GC，HPLC：检查其保留行为是否与对照品一致。：检查其保留行为是否与对照品一致。九、色谱行为特征十、显微结晶鉴别特色鉴别反应 巴比妥：长方形；巴比妥：长方形；苯巴比妥：球形苯巴比妥：球形花瓣状花瓣状1 1药物本身的晶形药物本身的晶形巴比妥铜吡啶试液巴比妥铜吡啶试液十字形紫色结晶十字形紫色结晶苯巴比妥铜吡啶试液苯巴比妥铜吡啶试液细小不规则或似菱形的浅紫结晶细小不规则或似菱形的浅紫结晶其他巴比妥药物不能形成结晶，可利用这一特性区分之。其他巴比妥药物不能形成结晶，可利用这一特性区分之。2 2反应产物的晶形反应产物的晶形用碱滴定液测定酸类物质的中和法称为用碱滴定液测定酸类物质的中和法称为酸量法酸量法。用酸滴定液测定碱类物质的中和法称为用酸滴定液测定碱类物质的中和法称为碱量法碱量法。一、酸量法第四节第四节 含量测定含量测定Assay 取本品约取本品约0.5 g0.5 g，精密称定，加乙醇，精密称定，加乙醇20 m120 m1溶解后，加麝溶解后，加麝香草酚酞指示液香草酚酞指示液6 6滴，用氢氧化钠滴定液（滴，用氢氧化钠滴定液（0.1 mo1/L0.1 mo1/L）滴定，）滴定，并将滴定结果用空白试验校正，即得。每并将滴定结果用空白试验校正，即得。每l mll ml氢氧化钠滴定氢氧化钠滴定液（液（0.1 mol/L0.1 mol/L）相当于）相当于22.63 mg22.63 mg的的C C1111H H1818
