芳胺类药物含量测定.ppt
芳胺类药物含量测定芳胺类药物含量测定n非水溶液滴定法非水溶液滴定法n分光光度法分光光度法n盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定n比色法比色法n高效液相色谱法高效液相色谱法非水溶液滴定法非水溶液滴定法n定义：定义：非水滴定是在除水以外的溶剂中进行非水滴定是在除水以外的溶剂中进行的滴定方法。的滴定方法。n适用范围：适用范围：有机碱、有机碱（有机碱、有机碱（K10-7）及其）及其盐类盐类n溶剂的选择：溶剂的选择：能增强样品的酸（碱）性；能增强样品的酸（碱）性；对试样的溶解性好；对试样的溶解性好；纯度高，使用安全，挥发性小，易回收。纯度高，使用安全，挥发性小，易回收。n n 常用的溶剂常用的溶剂 质子性溶剂质子性溶剂 非质子性溶剂非质子性溶剂 混合溶剂混合溶剂 注意注意 弱碱性药物弱碱性药物酸性溶剂酸性溶剂 弱酸性药物弱酸性药物碱性溶剂碱性溶剂 n碱性溶剂碱性溶剂:受质子受质子 如如 乙二乙二 胺，胺，DMFn酸性溶剂：给质子酸性溶剂：给质子 如如 冰醋酸冰醋酸n无转移性质子，只起分散无转移性质子，只起分散和稀释作用，如和稀释作用，如 氯仿氯仿n质子性溶剂和非质子性溶剂合质子性溶剂和非质子性溶剂合用，如冰醋酸酸酐用，如冰醋酸酸酐 常用的方法：常用的方法：n非水碱量法非水碱量法在在酸性酸性溶剂中用溶剂中用高氯酸高氯酸滴定剂滴定滴定剂滴定弱碱性弱碱性药物。药物。常用溶剂常用溶剂冰醋酸；冰醋酸；滴定剂滴定剂高氯酸滴定液；高氯酸滴定液；指示剂指示剂结晶紫；结晶紫；n非水酸量法非水酸量法在在碱性碱性溶剂中用溶剂中用甲醇钠甲醇钠滴定剂滴定滴定剂滴定弱酸弱酸性药物。性药物。常用溶剂：乙二胺、二甲基甲酰胺；常用溶剂：乙二胺、二甲基甲酰胺；滴定剂：甲醇钠滴定液滴定剂：甲醇钠滴定液 指示剂：麝香草酚蓝指示剂：麝香草酚蓝 盐酸利多卡因的非水滴定盐酸利多卡因的非水滴定原理：原理：侧链烃胺的侧链烃胺的叔氨基叔氨基有有弱碱性弱碱性，在冰醋酸中，在冰醋酸中，与高氯酸可以进行酸碱滴定。与高氯酸可以进行酸碱滴定。Hg(Ac)22NHCOCH2N(C2H5)2.HCLCH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2.HAcCH3CH3+HClO4NHCOCH2N(C2H5)2.HClO4 CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2.HAcCH3CH3+HAcHgCl2n醋酸汞作用醋酸汞作用：药物为药物为盐酸盐盐酸盐，高氯酸滴定时有，高氯酸滴定时有氢卤氢卤酸酸生成，生成，影响滴定终点影响滴定终点，加入醋酸汞，加入醋酸汞，清除氢卤酸的干扰。清除氢卤酸的干扰。n醋酐作用醋酐作用：有利于增强被测物的碱性。有利于增强被测物的碱性。n非水操作、标定液温度、滴定终点的确非水操作、标定液温度、滴定终点的确定定 注意注意思考题？思考题？本章药物采用非水滴定的药物有：盐酸利多卡因，本章药物采用非水滴定的药物有：盐酸利多卡因，盐酸丁卡因，盐酸布比卡因。它们可以用亚硝酸盐酸丁卡因，盐酸布比卡因。它们可以用亚硝酸钠法测定吗？为什么？钠法测定吗？为什么？分光光度法分光光度法n应用：应用：对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚原料原料及其制剂含量测定及其制剂含量测定n测量方法测量方法：中国药典中国药典(2000版版):百分吸收系数（百分吸收系数（E11CM）法）法 原理原理：对乙酰氨基酚在对乙酰氨基酚在0.4NaOH溶液中，于溶液中，于 257nm处有最大吸收。处有最大吸收。USP(24)：对照品比较法：对照品比较法 原理：原理：对乙酰氨基酚在甲醇水混合溶剂中，对乙酰氨基酚在甲醇水混合溶剂中，于于244nm处测处测A。优点：优点：较亚硝酸钠滴定法灵敏度高，操作简单。较亚硝酸钠滴定法灵敏度高，操作简单。中国药典中国药典(2000版版):百分吸收系数（百分吸收系数（E11CM）法）法方法方法：本品本品40mg0.4NaOH50ml 250ml，摇匀，精，摇匀，精密量取密量取5ml，0.4NaOH10ml 100ml,257nm处测处测A。E11cm 715 计算：计算：A=E1%cmCL C%=A/E1%cm 水A 50100 1000 715 40样品样品%A FE1%cm W USP(24)：对照品比较法：对照品比较法方法：方法：分别配置供试品和对照品，在同样条件下测分别配置供试品和对照品，在同样条件下测A，计算含量。，计算含量。计算：计算：A样样/A标标=C样样/C标标 样品样品%=A样样/A标标 C标标F/W100%比较比较：USP(24)：消除其它成分、仪器和溶剂等对光的反射消除其它成分、仪器和溶剂等对光的反射和吸收带来的测定误差；需要有标准品；多次测和吸收带来的测定误差；需要有标准品；多次测定。定。Ch P(2000):无需标准品；测定一次；仪器等误差大。无需标准品；测定一次；仪器等误差大。荧光分析法荧光分析法原理：原理：物质受光照射后，发射出荧光，在一定浓度物质受光照射后，发射出荧光，在一定浓度范围内，当激发光强度等外界条件一定时，物质范围内，当激发光强度等外界条件一定时，物质的荧光强度与浓度成正比关系。的荧光强度与浓度成正比关系。特点：特点：灵敏度高，专属性好。灵敏度高，专属性好。本身或与荧光衍生剂作用产生荧光本身或与荧光衍生剂作用产生荧光 低低浓度溶液中进行浓度溶液中进行 须做须做空白空白对照对照 exemn1光源光源n2单色光器单色光器1n3、6狭缝狭缝n4样品池样品池n5单色光器单色光器2n7检测器检测器吸收池吸收池；仪器装置成直角；仪器装置成直角注意：注意：F测紫外吸光度测紫外吸光度Fnm激发光谱激发光谱荧光光谱荧光光谱测定方法：测定方法：标准对照法（一点法）标准对照法（一点法）irrb Cr 标准曲线法（标准曲线法（y=bxa）由标准曲线或回归方程求出由标准曲线或回归方程求出C样，再样，再根据根据F，W求出样品求出样品%。注意：注意：灵敏度高，干扰因素多，因此多采用灵敏度高，干扰因素多，因此多采用标准品对照法标准品对照法.盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定：盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定：n原理：原理：芳伯氨基荧胺芳伯氨基荧胺荧光物质荧光物质测定测定exex 400nm,400nm,emem485nm485nm处荧光强度。处荧光强度。CONHCH2CH2N(C2H5)2NH2+oooCOOHNOHOCONHCH2CH2N(C2H5)2 计算：计算：标准曲线法标准曲线法 注意：注意：反应条件：反应条件：7.57.5(磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液)本法也适用于普鲁卡因胺制剂的测定，若测定浓本法也适用于普鲁卡因胺制剂的测定，若测定浓度大于度大于0.25ug/ml0.25ug/ml2.5ug/ml2.5ug/ml的注射液时，可用水的注射液时，可用水适当稀释后测定。适当稀释后测定。优点：优点：与芳伯氨基重氮化法比较与芳伯氨基重氮化法比较灵敏度高灵敏度高，操作简单操作简单.比色法比色法n原理：原理：有色物质溶液的颜色深浅与浓度有一定有色物质溶液的颜色深浅与浓度有一定关系，且有色物质在可见光区有一定吸收，关系，且有色物质在可见光区有一定吸收，通过测定通过测定A A来测定物质浓度。来测定物质浓度。n方法：方法：（1）重氮化偶合反应重氮化偶合反应有色偶氮染料有色偶氮染料 特点特点:专属性专属性低低，凡能重氮化的有机化合，凡能重氮化的有机化合物均可以。物均可以。（2）经缩合反应生成有色络合物经缩合反应生成有色络合物 以盐酸普鲁卡因为例介绍：以盐酸普鲁卡因为例介绍：n原理：原理：n方法：方法：标准曲线法标准曲线法n特点：特点：专属性强，准确。适合于盐酸普鲁卡因专属性强，准确。适合于盐酸普鲁卡因及其制剂，普鲁卡因青霉素及其注射剂的测定。及其制剂，普鲁卡因青霉素及其注射剂的测定。肾上腺素、青霉素、焦亚硫酸钠、硝基苯及氯肾上腺素、青霉素、焦亚硫酸钠、硝基苯及氯甲酚等不干扰。甲酚等不干扰。COOCH2CH2N(C2H5)2+SO3Na2O+H2O NOHOHSO3Na+NaHSO4OHO O+NH2 高效液相色谱法高效液相色谱法优点：优点：不需提取分离，方法简便、快捷，回收率高，不需提取分离，方法简便、快捷，回收率高，稳定性、重复性较好。稳定性、重复性较好。应用：应用：糖浆中盐酸普鲁卡因的含量，感冒灵颗粒中糖浆中盐酸普鲁卡因的含量，感冒灵颗粒中对乙酞氨基酚等。对乙酞氨基酚等。方法：方法：内标法，标准曲线法。内标法，标准曲线法。谢谢
