试验二培养基的配制与灭菌2.ppt

是一切对微生物进行研究和利用工作的基础是一切对微生物进行研究和利用工作的基础任何培养基都应具备微生物生长所需六大营养要素任何培养基都应具备微生物生长所需六大营养要素碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理1.天然培养基天然培养基2.半合成培养基半合成培养基 3.合成培养基合成培养基 nYPD 或YPED，又叫酵母浸出粉胨葡萄糖培养基，加入琼脂的又叫酵母膏胨葡萄糖（YPD）琼脂培养基。主要用于酵母菌的培养。n n 3、马丁氏培养基、马丁氏培养基4、实验二、培养基的灭菌实验二、培养基的灭菌 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌n高压蒸汽灭菌锅是一个耐高压又密闭的金属锅。它是利用在密闭条件下产生高压蒸汽来达到灭菌的效果。其温度在100oC以上，有强大的杀菌能力。因此它是一种用途广泛，效率高的灭菌工具。n分类：1、卧式 2、立式 具体操作步骤：（1）加入适量自来水于灭菌锅中（至水位线）（2）摆入上述包装好的待灭菌的培养基，注意：不要摆得太挤，以免影响蒸汽流通和灭菌效果（3）加盖旋紧螺旋，使蒸汽锅密闭不漏气（对角线均匀拧旋）n（4）打开放气阀，打开电源，自开始产生蒸汽后10分钟（此时蒸汽锅内的冷空气由排气阀排尽）关紧放气阀，让温度随蒸汽压力上升而上升，当达所需压力时（15磅/时2）控制热源维持所需时间（20分钟）然后停止加热，让其自然冷却。n（5）待压力降至0磅时，打开排气阀，再打开锅盖，取出灭菌物。n注意：压力未降至0磅时，切勿打开锅盖，否则突然降压，招致培养基沸腾，沾湿棉塞，甚至冲出管外。n（6）自锅中取出灭菌好的培养基，而后至37oC恒温箱培养24小时，无菌生长，方可保存备用。n 应用此法灭菌是否彻底的一个重要关键是在压力上升之前，必须将锅内的冷空气完全排尽，否则虽然压力表已指15磅/时，但锅内的温度还只有100oC，结果往往造成灭菌不彻底。斜面摆放示意图：