血清总胆固醇测定标准操作规程.docx

血清总胆固醇测定标准操作规程1 .检验原理：（氧化酶法）血清中总胆固醇（TC）包括游离胆固醉（FC）和胆固静酯（CE）两部分。血清中胆固静可被脂蛋白酯酶水解为游离胆固醇和游离脂肪酸（FFA）,胆固醇在胆固醇氧化酶的氧化作用下生成胆的烯酮和过氧化氢，过氧化氢在4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠存在时，晶过氧化物酶（POD）催化，反应生成苯醍亚胺非那腺的红色醍类化合物，其颜色深浅与标本中TC含量成正比。胆固醇酯+H2O2三胆固醇+脂肪酸胆固醉+O2三三三胆韵烯酮+/O?2”2。2+4-八人+对羟基苯甲酸钠一一红色晶类物质+4”2。22 .试剂主要组成成分产品组成成分浓度Rl三羟基氨基甲烷1OOmmo1/LTritionX-1000.5%(V/V)R2胆固醇酯酶0.4mmolL对羟基苯甲酸钠50mmolLTritionX-1000.5%(V/V)4-氨基安替比咻0.4mmolL叠氮钠0.5%(W/W)胆酸钠5mmolL胆固醇氧化酶400U/L过氧化物酶3000U/LSTD胆固醇5.17unolL3.样本要求：新鲜无溶血血清。在2225°C保存8小时，28"C保48小时,-20可保存1年。样本应避免反复冻融！4.检验方法；仪器法（详见DF-603Db600标准操作规程）5参考范围：样本参考范围（mmolL）血清<5.26.检验结果的解释：6. 1样本含量超出线性范围时，建议用O.9%（WV）的氯化钠溶液稀释样本。7. 2.单位换算：mgdl=mmolL×38.78. 检验方法的局限性8.1 结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。7. 2若试剂浑浊，或以水空白在500nm处吸光度大于0.080时不能使用。8.试剂性能指标8.1 试剂外观：无色透明或淡黄色液体，无悬浮物及沉淀。8. 2装量：不低于标识值。8 .3空白吸光度：在50Onnl处，光径ICnl时，空白吸光度A0.0809 4线性区间:试剂的线性区间为0.5-20.0InmOI/L,在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b）性.0-20.0mmolL区间内,线性相对偏差不超过±10机8. 5准确度：使用具有溯源性的标准品进行测定，实测值与标识值的相对偏差应在±10%内。8. 6分析灵敏度:在50Onm处,光径IenI时,测量已知浓度样品换算成ImnloI/L的总胆固醇时，吸光度变化4A三olL20.0028. 7批内精密度:CV4.0%8. 8批间差：R6.0%8.9稳定性：（2-8）下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试，应满足1-8.7的要求。8.10校准品8.10.1外观：无色透明液体。8.10.2净含量：不少于标识值8.10.3准确度：标准生化分析仪和试剂后，测定校准品，相对偏差应不大于±10%。8.10.4均一性：瓶间均一性：CV5%8.10.5稳定性：（2-8）C下，原包装存放的试剂有效期为12个月.取到期后1个月的试剂进行测试，应满足8.10.1-8.10.4的要求。9.临床意义：胆固醇是C3位置结合有羟基的类固醇。很多组织均合成胆固醇，尤其是肝脏或小肠壁。体内约3/4的胆固醇均为合成的，只有1/4来源于饮食。胆固醇的监测用于评估罹患动脉硬化的风险以及对脂类/脂蛋白的代谢紊乱进行诊断和监测治疗。