石蜡制片HE染色实验报告.docx

石蜡制片HE染色实验报告一、实验器材及试剂1、实验器材名称厂家型号脱水机武汉俊杰电子有限公司JJ-12J包埋机武汉俊杰电子有限公司JB-P5病理切片机上海徐卡仪器有限公司RM2016冻台武汉俊杰电子有限公司JB-L5组织摊片机浙江省金华市科迪仪器设备有限公司KD-P烤箱上海慧泰仪器制造有限公司DHG-9140A载玻片及盖玻片江苏世泰实验器材有限公司C正置光学显微镜日本尼康NIKONECLIPSECI成像系统日本尼康NIKONDS-U32、主要实验试剂试剂无水乙静二甲苯苏木素-伊红染液盐酸氨水中性树胶厂家货号国药集团化学试剂有限公司国药集团化学试剂有限公司武汉百仟度生物科技有限公司B1002国药集团化学试剂有限公司国药集团化学试剂有限公司国药集团化学试剂有限公司二、组织石蜡包埋切片实验步骤1、取材：新鲜组织固定于4%多聚甲醛24h以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内。2、脱水：将脱水盒放进吊篮里于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精Ih-无水乙醇I30min-无水乙醇II30min-醇苯5-1Omin-二甲苯I5-1Omin二甲苯II5-1Omin-蜡IIh-蜡Ih蜡IIIIho3、包埋：将浸好蜡的组织于包埋机内进行包埋。先将融化的蜡放入包埋框，待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。于-20。冻台冷却，蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。4、切片：将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片，片厚4m°切片漂浮于摊片机40C温水上将组织展平，用载玻片将组织捞起，并放进60eC烘箱内烤片。待水烤干蜡烤化后取出常温保存备用。三、HE染色实验步骤1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯I20min-二甲苯20min-无水乙醇IIOmin-无水乙静IllOmin-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸储水洗。2、苏木素染细胞核：切片入HaITiS苏木素染3-8min,自来水洗，1%的盐酸酒精分化数秒，自来水冲洗，0.6%氨水返蓝，流水冲洗。3、伊红染细胞质：切片入伊红染液中染色l-3min04、脱水封片：将切片依次放入95%酒精I5min-95%酒精II5min-无水乙静I5min-无水乙醇Il5min-二甲苯I5min-二甲苯5min中脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。5、显微镜镜检，图像采集分析。染色结果：细胞核蓝色，细胞质红色。