特异组蛋白修饰介导砷诱导氧化应激机制研究.docx

特异组蛋白修饰介导碑诱导氧化应激机制研究马璐'*,李军，章征保,，陈丽萍*,李道传,肖勇梅二张爱华12,陈雯,2贵州医科大学公共卫生学院毒理学教研室，环境污染与疾病监控省部共建教育部重点实验室*中山大学公共卫生学院预防医学系，广州市环境污染与健康风险评价重点实验室1第一作者：，2责任作者：，摘要：【目的】探讨组蛋白修饰与碑暴露和碑毒性的关系，并通过对特异组蛋白修饰介导的神氧化应激机制的研究，阐述碑诱导氧化应激的表观遗传机制。【材料和方法】利用亚碑酸钠（NaASO2）处理人外周血原代淋巴细胞，筛选响应碑暴露的特异组蛋白修饰；选择贵州省燃煤污染型碑中毒病区185例神暴露者作为碑暴露组（包括病区非病人、轻度、中度和重度碑中毒病人），以非种污染村77例健康村民为对照组，分析特异组蛋白修饰改变与碑暴露、碑中毒及碑诱导的氧化损伤间的关联；利用染色质免疫共沉淀（ChlP）和Q-PCR检测NaASo2作用下特异组蛋白修饰对氧化应激应答基因表达的调控，阐述特异组蛋白修饰在碑诱导氧化应激过程中的作用；构建低剂量碑长期染毒的细胞模型，结合人群研究结果，进一步验证特异组蛋白修饰与氧化应激应答基因表达及碑诱导氧化损伤间的关联。【结果】用NaASo2处理原代淋巴细胞，组蛋白H3K9/14/18ac、H3K9me2及H3K36me3修饰水平的改变与NaASo2处理呈剂量反应关系。人群研究发现，上述组蛋白中H3K18aaH3K9me2及H3K36me3的修饰水平与尿碑、发碑浓度相关，随碑暴露水平增加，H3K18ac和H3K9me2修饰水平降低（P<0.001）>H3K36me3修饰水平升高（PVO.05）；其中H3K18ac的修饰水平与尿8-OHdG水平及神中毒患病率呈负相关（PV0.05）,提示其可能参与碑诱导的氧化应激反应；通过体外细胞实验进一步证明，NaAsCh诱导下，随着胞内ROS水平的增加，H3K18ac修饰水平升高，且在GCLC.GCLM.Ho-1、HSP70、HSP90、SoO/等基因启动子区募集增加并激活该类氧化应激应答基因的转录；同时NaASO2长期诱导的细胞模型显示，H3K18ac水平下调伴随上述基因转录抑制，以及DNA氧化损伤（8-OHdG）增加。【结论】伸暴露可引起人群淋巴细胞的组蛋白H3K18acsH3K9me2.H3K36me3的修饰改变，其中H3K18ac修饰的改变可能通过调控抗氧化基因GCLC.GCLM.HO-I.HSP70、HSP90、SODl的表达参与碑诱导的氧化f员伤。提示H3K18ac可作为评价碑暴露及早期预测碎毒性的生物标志物。关键词：碑暴露，碑中毒，H3K18ac,氧化应激反应基金号：国家自然科学基金重点项目（NO）