母婴消毒柜杀菌、长效储存试验方法、餐饮具规格数量.docx

附录A（规范性）杀菌试验方法A.1方法概述将微生物悬浮液涂覆到餐饮具上，干燥后装载到消毒柜中，运行指定的消毒程序。对染菌载体在程序前后的微生物残留量进行统计，计算细菌杀灭效果。A.2试验菌种和器具A.2.1试验用菌大肠杆菌ESeAeric'CGMCC1.90金黄色葡萄球菌StaphylococcusaureusCGMCC1.89单核增生李斯特氏菌LiSteriamonocytogenesCGMCC1.10753A.2.2菌种活化和菌液制备将标准试验菌株接种于斜面固体培养基上，在（37±1）条件下培养24h后，在5°C10°C下保藏（不得超过1个月），作为斜面保藏菌。将斜面保藏菌转接到平板固体培养基上，在（37±1）°C条件下培养（24±1）h,每天转接1次。试验时应采用35代、24h内转接的新鲜细菌培养物。用接种环从新鲜培养物上刮1环2环新鲜细菌，加入适量0.9%的生理盐水中，并依次做10倍梯度稀释液，选择菌液浓度为（15）Xl（）8cFUmL的稀释液作为试验用菌液，按GB4789.2的方法操作。A.2.3仪器 生化培养箱：温控最大允许误差±1C； 冷藏箱：5-10； II级生物安全柜一一压力蒸汽灭菌器一平皿、试管、移液管（最大允许误差±0.（HmL）、接种环、酒精灯等实验室常用器具。A.3试验负载根据制造商声明或说明书规定，按照产品宣传可消毒的餐饮具材质，选择附录C中的一种或多种餐饮具作为负载。试验前，采用干燥箱(160,2h)对负载进行灭菌处理。待负载温度降至37以下方可使用，应确保器具中没有残留1次使用时的添加物。不能进行高温处理的塑料餐饮具，可用75%酒精擦拭3遍，用无菌水冲洗，无菌环境下晾干。A.4试验步骤A.4.I试验样机准备试验前样机空载运行2个消毒程序。A.4.2试验过程A.4.2.1污染负载制备对每种负载使用量的50%进行污染。如50%的负载量非整数，可进位取整。每种负载涂覆菌液的量可见表A.1。涂覆后在室温下静置Ih,待负载表面无明显流动痕迹后即可使用。表A.1负载涂覆污染物用量序号负载名称菌液用量mL1儿童碗12奶瓶23奶嘴0.54儿童勺0.25儿童筷0.26儿童盘17儿童餐盘/每个食物槽18佐料碟0.5A.4.2.3装载运行将涂覆污染物的负载按照试验样机的装载量进行装载，装载结束后，运行指定的消毒程序。测试应在额定工作状态下进行。A.4.2.4洗脱培养程序运行结束后，将负载取出，每件负载表面残留物用20mL无菌生理盐水洗涤，掉洗脱液中残留微生物量进行计数。计算每种负载回收的残留微生物的平均数。A.4.2.5阳性对照按照与试验组相同方法制备染菌负载2件，室温下放置与试验组测试程序相同时间后，直接回收。A.5计算按下列公式A.1计算细菌杀灭效果。P=IgA-feB(A.1)式中：P一一细菌杀灭对数值；A对照组每种负载上回收的平均微生物残留量，CFU/件；B试验组每种负载上回收的平均微生物残留量，CFU/件。附录B（规范性）长效储存试验方法8.1 方法概述将食具装载至消毒柜内，储存72h后取出，随机抽取试验负载进行表面微生物测试。8.2 试验环境试验采取无菌操作技术，试验室环境应符合GB19489的要求。样机运行环境温度为（23±2）（，相对湿度为（50±10）%。8.3 仪器和材料a）生化培养箱温控精度±Cb）振荡培养箱温控精度±rcc）二级生物安全柜d）压力蒸汽灭菌器e）冷藏箱（5-10）OCf）移液管、培养皿等试验室常规器皿。8.4 试验负载根据制造商声明或说明书规定，按照产品宣传可消毒的食具材质，选择附录C中的一种或多种食具作为负载。试验前，采用干燥箱（160,2h）对负载进行灭菌处理。待负载温度降至37以下方可使用，应确保器具中没有残留1次使用时的添加物。不能进行高温处理的塑料负载,可用75%酒精擦拭3遍，用无菌水冲洗，无菌环境下晾干。8.5 试验方法8.5.1 样机的准备样机按照说明书要求进行安装。试验前样机空载运行2个消毒程序。8.5.2 试验负载的准备1）在所用的负载表面涂覆营养肉汤（NB）,涂覆量按照表A.1,涂覆后在室温下静置Ih,待其表面无明显流动痕迹后即可。2）涂覆后，将所有负载在以25Lmin流速的自来水冲洗Imim3）在无菌环境下沥干水分，装载至样机中。8.5.3 装载运行将沥干水分的试验负载按照待测样机的装载量进行装载，装载结束后，运行指定的消毒程序。8.5.4 洗脱培养程序运行结束72h后，从试验样机的不同位置随机抽取试验负载，采集的试验负载量不低于额定容量的10%,采集试验负载包含所有材质。用无菌生理盐水以20mL件的量冲洗采集的负载表面，将洗脱液按照GB4789.2进行菌落计数。附录C(规范性)餐饮具规格数量餐饮具规格数量见表C.I.表C.1餐饮具规格数量序号食具名称尺寸(mm)材质单个质量(g)1儿童碗103×52塑料PP1752儿童碗135×115×45竹纤维623儿童碗110×67木质1254儿童碗115×45小麦秸秆220mL5儿童碗110×50硅胶2106奶瓶/奶嘴(45±5)×(140±5)玻璃/硅胶190.0±5.07儿童勺140不锈钢40.0±8.08儿童盘170×30密胺树脂(MF)1319儿童盘(pl55×10甘蔗纤维/10儿童筷183稻壳5111儿童餐盘25×20不锈钢22012佐料碟96×23强化瓷90.0+10.0