2025年基孔肯雅热实验室检测方案.docx

2025年基孔肯雅热实验室检测方案一、检测对象与适用场景1 .疑似病例o发热（38oC）伴急性关节痛/关节炎，且发病前14天内有疫区旅居史或蚊虫叮咬史。O无典型关节痛症状的儿童或老年人，但出现发热、皮疹等非特异性症状。2 .聚集性疫情O同一社区/单位短期内出现2例发热伴关节痛病例，需启动应急检测。3 .入境筛查o来自东南亚、非洲、南美等流行区的发热旅客。二、样本采集与处理样本类型采集时间窗处理要求血清/血浆发病后1周内（急性期）4保存，24小时内送检；-70长期冻存全血发病后5天内（病毒血症期）EDTA抗凝，避免溶血恢复期血清发病后2-4周与急性期血清配对检测，确诊抗体转化注意：样本运输需符合生物安全三级包装标准，避免反复冻融。三、核心检测方法及流程（一）病原学检测1 .核酸检测（RFPCR）。适用期：发病后1周内（病毒血症期）。靶基因：EKnsPl等保守区基因，引物设计参考WHo推荐序歹ILO阳性判定：检出特异性片段且Ct值335。2 .病毒分离o适用Vero>C6/36细胞系，需BSL-3实验室操作。（二）血清学检测LIgM抗体检测3 窗口期：发病后5天至3个月，阳性提示近期感染。4 假阳性处理：需经中和抗体试验确认（如PRNT）。2.IgG抗体检测O恢复期血清IgG滴度较急性期升高4倍可确诊。优先策略：急性期首选核酸检测，发病5天后补充IgM检测。四、结果解读与报告检测结果临床意义行动建议核酸阳性/IgM阳性确诊感染立即上报并启动防蚊隔离核酸阴性+IgM阴性排除感染或窗口期未检出恢复期血清复测IgG单阳性（无急性期样本）提示既往感染结合流行病学史评估五、质量控制与生物安全1 .质控要求o每批次检测需包含阴性对照、阳性对照（灭活病毒或合成核酸）。O商业化试剂需具备国家农药登记证号（驱蚊产品同理）。2 .生物安全3 病毒分离在BSL-3实验室进行，血清检测需BSL-2防护。4 废弃物需高压灭菌（121,30分钟）。六、特殊场景应对1 .大规模筛查：o采用核酸混检（5:1）,阳性样本再拆分。2 .跨境输入防控：o口岸配备快速IgM胶体金试剂（15分钟出结果）。3 .康复期监测：。关节痛持续者每月复查IgG,评估慢性炎症。七、检测网络建设要求1 .基层机构：具备血清学快速检测能力（IgM/IgG胶体金法）。2 .地市级CDc配备RT-PCR及核酸提取设备，覆盖核酸检测需求。3 .省级参比实验室：负责病毒分型、抗体确认及技术督导。