实验五 细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的制片和简单染色.docx

试验五细菌、放线菌、酵母菌和霉菌的制片和简洁染色一.试验器材1 .菌种枯草芽泡杆菌12-18ho金黄色葡萄球菌24h牛肉皆蛋白陈琼脂泄密安培育物等。2 .溶液和试剂草酸钱结晶紫染液，齐氏碳酸复红染液，吕氏碱性美蓝染液，革兰氏染色用典液，乳酸碳酸棉蓝染液。3 .仪器和其他用品酒精灯，载玻片，盖玻片，显微镜，双层瓶，擦镜纸，接种环，接种铲，接种针，镶子，载玻片夹子，载玻片支架，玻璃纸，平皿V型玻璃棒，滴管，解剖针，解剖刀，生理盐水，50%乙醇，20%甘油，高氏1号培育基平板。二.目的要求1 .学习并把握微生物的制片及简洁染色的基本技术2 .初步了解细菌，放线菌，酵母菌及霉菌的形态特征3 .巩固显微镜操作技术及无菌操作技术.基本原理放线菌菌体由基内菌丝，气生菌丝和电子丝组成，制片时不采纳涂片法以免破坏细胞及菌丝体形态。通常采纳插片法或玻璃纸法并结合菌丝体简洁染色进行观看，在插片中首先将灭菌盖玻片插入接种有放线菌的平板，使放线菌沿盖玻片和培育基接触生长而附着在盖玻片上，取除盖玻片上，取出盖玻片可直接在显微镜下观看放线菌在自然生长状态下的形态特征，而且有利于对不同生长时期的放线菌形态进行观看。采用单一染料对菌体进行染色的方法称为简洁染色。用于染色的染料是一类苯环上带有发色基因的有机化合物。常采纳碱性染料进行简洁染色，缘由在于微生物细胞在碱性、中性及弱酸性溶液中通常带负电荷，而染料电离后染料部分带正电荷，很简洁与细胞结合使其着色；当细胞处于酸性条件下，所带正电荷增加时，可采纳酸性染料染色。四、操作步骤(一)细菌制片及简洁染色。1涂片。2、干燥。3、固定。4、染色。5、水洗。6、干燥。7、镜检。(-)酵母菌制片及简洁染色。水一碘液浸片法。将革兰氏染色用碘液用水稀释4倍后，滴加一滴于载破片中心，无菌操作取少许菌体置于染色中混匀，盖上破片后镜剑。五、思索题。