响应面法优化酶法制备薏苡仁寡糖工艺研究.docx
文章亮点(I)以卷故仁为原料,将纤维送酣运用于益馍仁寡融的提取，与传统热水提取法相比，具有较高得率且条件温和；(2)通过单因案试验，构建响应面二次多项式模型，研究各因素间的交互作用,并得出各因子影响程度和最佳提取条件,准确可靠，低耗高效：(3)微波超声波联合辅助提取技术，结合超声与微波雎一技术的优点，进一步提升提取效率，为深入研究天然产物的高效提取技术提供了参考依据。图文介绍1实验部分1.1 主要仪器与试剂1.2 实险方法1.2.1 附解提取慈短仁喜能的工艺流程1.2.2 .您或仁葬树含附的测定M雎因素试验设计称取5g.世位仁干粉，固定。-淀粉的添加量0.3g醉解时间30min、睥解温度50T.分别采用1：】0、1:20、1:30、1:40、1:50、1:6()®m1.)料液比,按1.2和1.2.2中的方法提取样品溶液井测定其吸光度，考察不同的料液比时赛期得率的影响。试险设计见表1°表I响应面因素设计Tab.IK<sM>nsivedesignofsurfe<efactorsA料液比/(gm1.,)BIW添加收/gCIW解时间/minI)IW解温度/-I1：100.880400I：200.914511：301.0120501.5数据处理各试验做3次平行,结果取平均值：分别利用DPS7.05、Origin2018、DesignExpert8.0软件,对试验数据进行分析.绘图和建立响应面模型.2结果与讨论2.1 单因泰时测定意林仁中寡糖得率的影响2.1.1 不同料液比对彘议仁春糖得率的影响从图1可以看出,寡糖得率随料液比提升而上升,可能是料液比提高.传质推动力上升.靠糖扩散过程增快内；当其超过1:20(gm1.)后，森触税率下降并逐渐趋于植定，这可能由于前1.j底物接触机会减少细胞壁降解减弱,寡樵扩散减慢.并且料液比过大也会浪费溶剂不利实际生产以及后续浓缩.所以将料液比控制在1:20(gm1.)设适宜.28$!HOl：20lbl：40l：50l：60料液比/(rml/)图1料液比对慈演仁其附得率的影响Eig.1ln>a<-t«»fnat<*rialtoliquidrati<>sonth<yi<l<lofoligosaccharidesf11>nCoixIaeryma2.1.2不同梅添加量对蕙位仁取糖得率的影响因图2发现,陋着筋添加量的增加,趋演仁褰助的得率稳步上升，在前添加址为0.9g时达到峰值，后好期得率呈现下降趋势，水好程度的增加可能使喜糖含麻达到嵬和状态，小分子低聚糖的水解M于多链式反应,水解到定程度后低聚期的水解速度变悔甚至有些低聚期不能水解川，所以。淀粉脚添加录为0.9g酸适宜.图2酹添加量对蕙截仁寡犍得率的影响Fig.2Impactofenzymea<klingUmoUn忸ontheyiel<iofolig6a<-elmrkksf11N11CoixIacnnw2.13不同陆解时间对遵仪仁班能得率的影响由图3可知,随解解时3延长，裁谀仁寡辅得率逐步递增,但是当超过100min后，骅糖得率逐渐趋于稳定，时间太短会提取不充分,达至酷活性没被激活，时间增大祗馍仁颗粒己经充分溶胀，寡期也得到充分溶出，但是时间的延长，部分溶液中的游离新璃酸可能与赛箱进行关拉出反应,使溶液变深，媒搐得率的得率也会因此受到不好的影响.故酷解时间为I(K)min最Ifi宜。.5.OS9595.OSZ21.1.0.0.9.9.S.3333#3222*-i图3修解时间对超诙仁寡糖得率的影响Fig.3lnNM-t<rft*z)iiati<,<ligrsliontin<sonlhyi<l<lofolig<sa<<harkl<sfnnn(hxIacnnu2.1.4不同陆解温度时葭位仁寡精得率的影响从图4可知,梅解温度递增的同时.这或仁寡糖的得率逐步升高45C为峰值,每种酹都有特定的破适M度范困,在此范国内都活性与讯度成正比，进步促进体系的热运动,我糖的褥率增大，但是温度过高会破涉度坏其能和酷结构导致谶变性甚至失活，而I1.温度过高产品的品质也会有所下降，故45I?为最适宜附解温度。崎解度/七.05.05QS.0S.0.5Q322I100990333333132222卓、*三fiw图4博解温度对惹位仁寡凿得率的影响Fig.4ln>a<'tofczmrsolutiontcmMralur*onlh<yieklOr<>lig<sa<-<-ari<lesf11mCOiXIncryma2.2响应面法优化卷饮（.分相提取的工艺条件单因素试验分析结果显示4个因素对慈武仁算瘫得率均有显着的影响效果.在此基础上，通过响应面探索«位仁寡网提取的最佳条件M,响应面试整设计及结果见表2。tKlt-H-UbwuUlQitAM*TakJHntfc<ewntrfE3r*tg11Milk«4AIlCIlHttttZMAtoit/叫"HItIB*/网WQ<,>B一TI-I-IOM.4)SQ2I-IJlq3)-1IOK.«1244IIO“M3SOO,1«|j.m3.00112MJ37OOI*4*It0011JI.JW3-IOOsmsIOI0M2W?Ii1OI>.ms12I0IM%32ISO-IO1I.MO3140I一1OJlWJIIS0-IIOn.o2IA0IIOMm:17-I0OJlM2I18I0.J1U2319-IOIOUWS2XI0IJl555I21O-IO1MMI2220I».512IB0-1IAISSI24OI1“RZ2S00.M-27600O13««v00OOJ12M831OOOUWIB00Jl%522.2.2 模型方差分析以赵以仁中寡糖得率为响应值.进行多元回归分析拟合.得到回归方程：)三33.08-0.l0+O.27B+0.20C4.38D+l.25×IOAB-2.575×IOAC-O.OI8D).O9OBCO.O13BD+0.1OCD-0.15A:-1.33Bj-O.2OC5-2.43D=.回归模型方差分析结果见表3.2.2.3 响应面结果分析响应面图是由响应值与各因子通过多元找性回归方程构成的曲面图，其坡度可以体现这一因子的作用程度,相互作用曲线越磋峭，则说明该因子对蕊馍仁寡糖得率的影响越大，同时对于反应值的改变幅度越大。变城间的交互作用程度可以通过其形状行出,其中娴凯)形、马鞅形表示交互作用较强.而网形则相反,极值存在的条件则在网心处.2.2.4 验证试验通过解回归方程可得最好的提取条件为料液比1:16.41gm1.),陶添加量0.91g、机解时间II1.49min、曲解温度4546C时，此时葱馍仁寡糖的理论得率为33.1862%。为了验证该回归模型的可靠性,调整实际试验参数为液料比1:16Wm1.)、施添加量0.9g、曲解时间Ulmin、梅解温度45C时，重史3次试验，得到得率平均值为33.0092%,与理论值基本一致，说明该模型准确可靠。3结论建立响应面二次多项式模型，优化的解发林提取慈盛仁春糖工艺，并时各因索间的交互作用进行研究，得出结论各因子影晌程度为：的解温度酹添加量陶解时间料液比：最佳提取条件为：料液比1:16.41(g/m1.)、的添加fit0.91g、陶解时间111.49min,的解温度45.46C时，蕙瑟仁宾拙的理论得率为33.1862%:实际测得期独得率为33(X)92%,与理论值基本一致，说明模型准确可维。的解发酵法可以有效地破坏细胞壁，分离蛋白质、纤维等其他物质，促进淀粉前解，使慈或仁塞糖更好地溶出，并且旃解条件温和,可以有效地保持蕙加仁宓糖的活性,该提取工艺可以为进一步深入研究避短仁寡糖提供参考依据。
