刺糖多糖脱色脱蛋白工艺及抗氧化活性研究.docx

背景介钿刺糖(Alhagi-honey)是豆科植物骆驼刺枝叶分泌凝结而成的流粒，在中医临床用药具有悠久的历史.本草纲目将刺糖列为药中上品，据记载其有滋养强健、平衡体液、祛痰止咳的功效。目前提取刺德多糖用水提醇沉法，所提取的多糖色素深，含有较多蛋白质，这些蛋白质与多糖结合形成糖蛋白后，严重影响了多糖的药效，且给后期分离均一多糖及相关结构鉴定造成很大困扰.本文亮点1响应面分析法以多元二次方程作为函数估算模型,能够把影响因素和实验结果的关系进行回归拟合，对比正交实验，考察范围更加全面；2该模型误差较小，稳定可靠，工艺操作简单，损耗量较小，适合在工业生产中大量使用.图文介绍1树脂的筛选实验结果1 .!树脂的静态吸附实验结果研究表明树脂影响多糖纯化效果的因素有树脂的结构、极性、比表面积、粒径、孔径及被吸附分子的极性、分子大小等.1.2树脂的动态吸附实验结果树脂的动杳吸附实蛇结果见表3,由技3可知高交联度、高比袤面积、不带有官能团的非极性聚合物型树脂XDA-I的加权评分M值评分最高，HI03型树脂脱蛋白率效果较差.表3刺糖多糖的动态吸附实验结果Tab.3Experimentalresultsofdynamica<lsoq)tionof.Alhagi-Iioneypolysaccharides树脂型号多糖保留率/%脱色率/%脱蛋白率/%加权评分f%XDA-I90.24±3.9573.53±4.8058.90±4.5375.83±3.02030176.70±1.0071.15±1.8461.92±8.8470.60±2.53H10390.42±0.9930.92±5.1920.34±5.405l.55±2.622单因素实验结果2 .上样浓度对加权评分M值的影响由图I可知，当上样浓度为003g/m1.时加权评分母高熊分为（71.33±2.60%.根据实睑结果可知随着上样浓度增加到一定程度后，加权评分Af值降低，树脂对多施的脱色率和脱蛋白率降低.0.0.020.040.060.080.10上样浓度/(gm1.)图1上样浓度对加权评分股值的影响Fig.1EfleclofloadingconcentrationontheweightedscoreMvalue2.2洗脱流速对加权评分M值的影响由图2可知，当洗脱流速为2ml./min时加权评分最高，得分为(79.86±l.62)%,随着洗脱流速的增加，加权评分,W值得分降低。东、手S冬s图2洗脱流速对加权评分.1/值的影响Fig.2E11e<tofelli<>nraleonllweigll<*<lSCOrr.Mvalue2.3上样量对脱色率的影响由图3可知，当第5管时平均脱色率为(7O.6O±I.34)%,在第5管以后脱色率小于70%,推测当上样量达到一定程度时，树脂对色素的吸附量达到饱和,当增加上样景时造成脱色率的下降.M80F60FW¾刈20IQIll2468IO洗脱管数图3上样量对脱色率的影响Fig.3EffectofsampleloadingOnthedecolorizationrate3多糖纯化前后吸收光谱特征分析UV扫描谱图如图5所示，未纯化多糖在400nm以下具有较强的杂吸收峰,并且在260和28Onm处有较强的吸收峰，表明粗多跑样品中存在较多蛋白质和核酸、含有其它一些杂质，纯化后400nm以下波长处的杂峰消失，说明经过XDA-I型大孔吸附树脂纯化后，蛋白质和核酸、其它杂质等被大员清除.图5纯化前后多糖的紫外吸收谱图Fig.5UVabsorptionxx-traofM*lysac<-hari(leM,f>11andafterPUrifiCHtion刺糖多糖纯化前后的FT-IR光谱图如图6所示,剌雄多糖纯化前后在3400Cml左右的吸收降为一OH的伸缩振动.2930和1415cm处的吸收峰为C-H振动吸收峰.1402040353000252(XX)15100O500o)OQO2(>86411卓/*宏国Vcm,图6纯化前后多糖的红外吸收谱图Fig.6infraredabso)tionSpeCIraof仰)IySaCCharideSbeforeandafterpurification4结论本文研究的工艺纯化后多穗的红外特征吸收峰未发生改变，不会破坏多糖的结构，增强了刺糠多糖对DPPH自由基的清除率。因此，此工艺对刺糖多糖后期分罔均一多槽、药理活性的研究以及抗氧化保健品的开发具有重要意义.